《生化危机5》的故事设定在《生化危机》事件结束后的10年。本作将逐步解开在《生化危机4》里的诸多未解之谜，当然《生化危机5》还很大程度上保持了前作的游戏方式，但也加入了一些新的特色。并且游戏在微软展前发表会上确定了上市日期。（2009年3月12日日版，2009年3月13日美版）

　　在游戏中将加入一名女性角色与玩家共同战斗，这名女性角色在单人模式中由AI控制，而在双人模式中另外一人就可以使用这名角色。玩家需要通过合作来完成游戏中的某些关卡，所以在这个谜团重重的神秘地区玩家只有通过合作才能生存下去。